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服务类：惠州市第一妇幼保健院LNK通过脂肪源性炎症因子促进PCOS高雄激素血症发生的新机制项目

1、临床水平检测LNK在PCOS患者中的表达变化，及其表达水平与PCOS患者脂肪炎症水平、血清雄激素水平的相关性

1.1收集PCOS患者和对照外周血样品，检测其中雄激素（睾酮、雄烯二酮、脱氢表雄酮）、血糖、血脂（TG、HDL、LDL）水平；ELISA检测其中促炎因子TNF、IL6、IL1和抑炎因子脂联素、IL4含量；检测30对样本；

1.2收集PCOS患者和对照大网膜脂肪组织，并统计对应的临床相关数据：年龄、身高、体重、体脂率；WB和免疫组化实验检测LNK表达；qPCR实验检测LNK、促炎因子TNF、IL6、IL1和抑炎因子脂联素、IL4的表达；流式细胞术检测其中巨噬细胞及M1、M2型巨噬细胞数量比例；统计分析LNK表达与脂肪炎症、血清雄激素水平的相关性（8对样本）。

2、细胞水平检测巨噬细胞LNK对 PCOS临床患者脂肪炎症水平的调控效应：从PCOS患者和对照大网膜脂肪组织中分选巨噬细胞，在使用siNC、siLNK干预LNK表达的基础上联合使用LPS诱导细胞，然后使用qPCR实验检测LNK、促炎因子TNF、IL6、IL1和抑炎因子脂联素、IL4的表达

3、小鼠模型中鉴定LNK对脂肪炎症水平和PCOS进程的调控效应

在野生型小鼠和LNK敲除小鼠基础上构建PCOS小鼠模型（WT-Con, WT-PCOS, LNK-/--Con, LNK-/--PCOS），然后开展以下实验：（每组5只）

3.1收集外周血，测定其中雄激素（睾酮、雄烯二酮、脱氢表雄酮）、血糖、血脂（TG、HDL、LDL）水平；ELISA检测外周血检测促炎因子TNF、IL6、IL1和抑炎因子脂联素、IL4含量；

3.2统计各组卵巢重量，并对卵巢组织进行HE染色，免疫组化或免疫荧光检测卵巢组织中雄激素受体AR、雄激素合成酶CYP11A1、CYP17A1表达；

3.3收集脂肪组织，WB和免疫组化检测LNK；qPCR检测LNK、促炎因子TNF、IL6、IL1和抑炎因子脂联素、IL4的表达；流式细胞术检测巨噬细胞及M1、M2型巨噬细胞数量比例；

3.4从脂肪组织中分离巨噬细胞，ELISA检测巨噬细胞上清促炎因子TNF、IL6、IL1和抑炎因子脂联素、IL4的表达；

3.5从脂肪组织中分离巨噬细胞，使用IL1或IL4诱导处理后，用各组巨噬细胞上清制成条件培养基培养卵泡膜细胞，WB和qPCR检测卵泡膜细胞雄激素受体AR、雄激素合成酶CYP11A1、CYP17A1的表达变化。

第1.1部分：

30对PCOS临床样本

第1.2部分：

8对PCOS临床样本

第2部分：

3例/组，共15例样本

第3部分：

20例样本

260000元（报价包含但不限于以下费用：车旅费、踏勘费、耗材费、人工费、场地费等项目实施过程中的应预见和不可预见费用。）

2025年5月

2025年3月18日